Il existe deux sources principales de contamination dans les salles blanches : les particules et les micro-organismes, qui peuvent être causés par des facteurs humains et environnementaux, ou par des activités associées au cours du processus. Malgré tous les efforts, la contamination continuera de pénétrer dans la salle blanche. Les vecteurs de contamination courants spécifiques comprennent le corps humain (cellules, cheveux), les facteurs environnementaux tels que la poussière, la fumée, le brouillard ou l'équipement (équipement de laboratoire, équipement de nettoyage) et les techniques d'essuyage et méthodes de nettoyage inappropriées.
Les personnes sont le vecteur de contamination le plus courant. Même avec les vêtements et les procédures opérationnelles les plus stricts, les opérateurs mal formés constituent la plus grande menace de contamination dans les salles blanches. Les employés qui ne respectent pas les directives des salles blanches constituent un facteur de risque élevé. Tant qu’un employé commet une erreur ou oublie une étape, cela entraîne une contamination de l’ensemble de la salle blanche. L’entreprise ne peut assurer la propreté de la salle blanche que par une surveillance continue et une mise à jour continue des formations avec un taux de contamination nul.
Les autres sources majeures de contamination sont les outils et l’équipement. Si un chariot ou une machine n’est que grossièrement essuyé avant d’entrer dans la salle blanche, il peut introduire des micro-organismes. Souvent, les travailleurs ignorent que l’équipement sur roues roule sur des surfaces contaminées lorsqu’il est poussé dans la salle blanche. Les surfaces (y compris les sols, les murs, les équipements, etc.) sont régulièrement testées pour vérifier leur viabilité à l'aide de plaques de contact spécialement conçues contenant des milieux de croissance tels que la Trypticase Soy Agar (TSA) et la Sabouraud Dextrose Agar (SDA). Le TSA est un milieu de croissance conçu pour les bactéries et le SDA est un milieu de croissance conçu pour les moisissures et les levures. Le TSA et le SDA sont généralement incubés à des températures différentes, le TSA étant exposé à des températures comprises entre 30 et 35 °C, ce qui correspond à la température de croissance optimale pour la plupart des bactéries. La plage de 20 à 25 °C est optimale pour la plupart des espèces de moisissures et de levures.
Le flux d'air était autrefois une cause fréquente de contamination, mais les systèmes CVC pour salles blanches d'aujourd'hui ont pratiquement éliminé la contamination de l'air. L'air dans la salle blanche est contrôlé et surveillé régulièrement (par exemple quotidiennement, hebdomadairement, trimestriellement) pour le nombre de particules, le nombre de particules viables, la température et l'humidité. Les filtres HEPA sont utilisés pour contrôler le nombre de particules dans l'air et ont la capacité de filtrer les particules jusqu'à 0,2 µm. Ces filtres fonctionnent généralement en continu à un débit calibré pour maintenir la qualité de l’air dans la pièce. L'humidité est généralement maintenue à un faible niveau pour empêcher la prolifération de micro-organismes tels que les bactéries et les moisissures qui préfèrent les environnements humides.
En fait, la source de contamination la plus élevée et la plus courante dans les salles blanches est l’opérateur.
Les sources et les voies d’entrée de contamination ne varient pas de manière significative d’une industrie à l’autre, mais il existe des différences entre les industries en termes de niveaux de contamination tolérables et intolérables. Par exemple, les fabricants de comprimés ingérables n’ont pas besoin de maintenir le même niveau de propreté que les fabricants d’agents injectables directement introduits dans le corps humain.
Les fabricants de produits pharmaceutiques tolèrent moins la contamination microbienne que les fabricants d’électronique de haute technologie. Les fabricants de semi-conducteurs qui fabriquent des produits microscopiques ne peuvent accepter aucune contamination particulaire pour garantir la fonctionnalité du produit. Ces entreprises ne se préoccupent donc que de la stérilité du produit à implanter dans le corps humain et de la fonctionnalité de la puce ou du téléphone portable. Ils sont relativement moins préoccupés par la moisissure, les champignons ou d’autres formes de contamination microbienne dans les salles blanches. De l’autre, les laboratoires pharmaceutiques s’inquiètent de toutes les sources de contamination vivantes et mortes.
L'industrie pharmaceutique est réglementée par la FDA et doit suivre strictement les réglementations en matière de bonnes pratiques de fabrication (BPF) car les conséquences d'une contamination dans l'industrie pharmaceutique sont très nocives. Non seulement les fabricants de médicaments doivent s’assurer que leurs produits sont exempts de bactéries, mais ils doivent également disposer d’une documentation et d’un suivi de tout. Une entreprise d’équipement de haute technologie peut expédier un ordinateur portable ou un téléviseur à condition qu’il réussisse son audit interne. Mais ce n’est pas si simple pour l’industrie pharmaceutique, c’est pourquoi il est crucial pour une entreprise de disposer, d’utiliser et de documenter les procédures opérationnelles des salles blanches. Pour des raisons de coûts, de nombreuses entreprises font appel à des services de nettoyage professionnels externes pour effectuer les services de nettoyage.
Un programme complet d’essais environnementaux en salle blanche doit inclure les particules en suspension visibles et invisibles dans l’air. Bien qu'il n'y ait aucune exigence selon laquelle tous les contaminants présents dans ces environnements contrôlés doivent être identifiés par des micro-organismes. Le programme de contrôle environnemental doit inclure un niveau approprié d’identification bactérienne des échantillons extraits. Il existe actuellement de nombreuses méthodes d’identification bactérienne.
La première étape de l’identification bactérienne, en particulier lorsqu’il s’agit d’isolement en salle blanche, est la méthode de coloration de Gram, car elle peut fournir des indices interprétatifs sur la source de contamination microbienne. Si l'isolement et l'identification microbienne révèlent des coques à Gram positif, la contamination peut provenir de l'homme. Si l'isolement et l'identification microbiennes montrent des bâtonnets Gram positifs, la contamination peut provenir de souches résistantes à la poussière ou aux désinfectants. Si l'isolement et l'identification microbienne montrent des bâtonnets à Gram négatif, la source de contamination peut provenir de l'eau ou de toute surface humide.
L'identification microbienne dans les salles blanches pharmaceutiques est très nécessaire car elle est liée à de nombreux aspects de l'assurance qualité, tels que les essais biologiques dans les environnements de fabrication ; tests d'identification bactérienne des produits finis ; organismes sans nom dans les produits stériles et l'eau ; contrôle de la qualité de la technologie de stockage par fermentation dans l'industrie de la biotechnologie ; et vérification des tests microbiens lors de la validation. La méthode utilisée par la FDA pour confirmer que les bactéries peuvent survivre dans un environnement spécifique deviendra de plus en plus courante. Lorsque les niveaux de contamination microbienne dépassent le niveau spécifié ou que les résultats des tests de stérilité indiquent une contamination, il est nécessaire de vérifier l'efficacité des agents de nettoyage et de désinfection et d'éliminer l'identification des sources de contamination.
Il existe deux méthodes pour surveiller les surfaces environnementales des salles blanches :
1. Plaques de contact
Ces boîtes de culture spéciales contiennent un milieu de croissance stérile, préparé pour être plus haut que le bord de la boîte. Le couvercle de la plaque de contact recouvre la surface à échantillonner et tous les micro-organismes visibles sur la surface adhéreront à la surface de la gélose et incuberont. Cette technique permet de montrer le nombre de micro-organismes visibles sur une surface.
2. Méthode d'écouvillonnage
Celui-ci est stérile et conservé dans un liquide stérile approprié. L'écouvillon est appliqué sur la surface testée et le micro-organisme est identifié en récupérant l'écouvillon dans le milieu. Les écouvillons sont souvent utilisés sur des surfaces inégales ou dans des zones difficiles à échantillonner avec une plaque de contact. L’échantillonnage sur écouvillon est davantage un test qualitatif.
Heure de publication : 21 octobre 2024